Как определить фенольный гидроксил?
Среди многочисленных цветных реакций на фенольный гидроксил наибольшее распространение в фармакопейном анализе получило испытание с хлоридом окисного железа. Возникающее в результате реакции окрашивание обычно бывает синим или фиолетовым и зависит от заместителей. С. Вайбель указывает на установленные опытным путем «следующие закономерности, не являющиеся, однако, справедливыми во всех случаях»:
1) замещенные фенолы, имеющие две гидроксильные группы в ортоположении, дают зеленую окраску;
2) наличие карбоксильной группы в орто-положении к гидроксилу приводит к появлению фиолетовой окраски вместо синей,
3) если карбоксильная группа находится в пара-положении по отношению к гидроксилу, окраска становится желтой или красной, интенсивность окраски в первом случае увеличивается, а в последнем - уменьшается, п-оксикарбоновые кислоты могут также образовывать с хлорным железом желтые или красноватые осадки,
4) мета-замещенные фенолы обычно дают слабую цветную реакцию или вообще не окрашиваются, однако м-диоксибензол (резорцин) окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет.
Разводят 1 мл 0,1% водного раствора адреналина 4 мл воды, прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа: сразу же возникает зеленое окрашивание, переходящее в вишнево-красное при прибавлении 0,5 мл разведенного аммиака. (Раствор адреналина гидрохлорида, ГФХ.)
Фенолы со свободным орто- или пара-положениями обесцвечивают бромную воду и образуют при этом продукты замещения, которые обычно выпадают в осадок и могут быть после перекристаллизации характеризованы по температуре плавления.
Так, трибромфенол, получающийся при бромировании фенола, после перекристаллизации из спирта и высушивания при 80° плавится при 92-95°.
Те же фенолы сочетаются с диазотированными первичными ароматическими аминами во всех случаях, когда замещения не находятся в мета-положении к аминогруппе или к другой оксигруппе.
Реакция описана выше при испытаниях на первичную ароматическую аминогруппу.
Многие фенолы со свободным пара-положением конденсируются с 4-хлорим,ин-2,6-дихлорхиноном с образованием окрашенных индофенолов. Индофенольная реакция может быть выполнена как в растворе, так и на фильтровальной бумаге.
Помещают по 1 мл 0,01% раствора в две пробирки, обозначенные соответственно А и Б, и прибавляют в каждую пробирку по 2 мл 20% раствора ацетата натрия. В пробирку А прибавляют 1 мл воды, в пробирку Б-1 мл 4% раствора борной кислоты и перемешивают. Охлаждают обе пробирки до 20° и быстро прибавляют в каждую пробирку по 1 мл 0,5% раствора 4-хлоримин-2,6-дихлорхино-на в спирте: в пробирке А возникает синее окрашивание, быстро исчезающее и переходящее через несколько минут в красное, в пробирке Б не возникает синего окрашивания. (Пиридоксина гидрохлорид. Международная фармакопея, Фармакопея США XVII.)
{mosimage}
Специфичность общего для фенолов метода достигается в случае пиридоксина за счет реакции двух молекул пиридоксина с одной молекулой борной кислоты, вследствие которой образуется соединение, не реагирующее с хлор-хиноном.
{mosimage}
Комплекс пиридоксина с борной кислотой
Последнее позволяет проводить контрольное определение, которое отличает пиридоксин от других фенольных соединений и от пиридоксамина и пиридоксаля, не имеющих оксиметиленовой группы в положении 4. Эта же реакция использована в X издании Государственной фармакопеи для испытания на отсутствие метилового эфира пиридоксина.
Фенолы переводят в ацетильные производные, нагревая вещество, растворенное в пиридине, с уксусным ангидридом.
0,2 г кипятят 5 минут с 1 мл уксусного ангидрида и 2 мл пиридина о колбе для ацетилирования. После охлаждения прибавляют 10 капель воды и после образования кристаллов еще 50 мл воды, колбу оставляют стоять при постоянном взбалтывании на 1 час. Фильтруют через стеклянный фильтр, промывая колбу ,и фильтр 50 мл воды. Сушат фильтр при 105°. Температура плавления полученного диацетата 121- 124°. (Диэтилстильбэстрол, Скандинавская фармакопея.)
Таким же образом определяются дикумарин, флюорес-цеин и фенолфталеин, температуры плавления ацетилпро-изводных которых соответственно 262-271°, 202-207° и 147-150°.
Как и в случае ароматических аминов, бензоаты фенолов представляют собой твердые кристаллические вещества, имеющие характерную температуру плавления.
0,03 г растертого препарата растворяют в колбе с притертой пробкой емкостью 50 мл в 12 мл 5% раствора едкого кали, охлаждают до температуры не выше 10° и прибавляют 3-4 капли бензоилхлорнда. Раствор энергично взбалтывают, выделившийся осадок отфильтровывают на маленький стеклянный фильтр № 3 или № 4, промывают 1-2 мл воды, переносят в колбу емкостью 25 мл, снабженную воздушным холодильником, прибавляют 2 мл метилового спирта и нагревают на водяной бане при помешивании до полного растворения, а затем
охлаждают во льду. Выпавший осадок отфильтровывают и сушат 30 минут в сушильном шкафу при 100-105°. Температура плавления полученного бензоата этинилэстрадиола 199-202°. (Этинилэсградиол, ГФХ.)
26.05.2015